做生物信息分析这行,我也算摸爬滚打好几年了。
最近好多刚入行的朋友问我。
说拿到数据一脸懵,不知道咋下手。
其实核心就俩字:注释。
特别是那些从GEO数据库扒下来的原始数据。
很多人以为下载个矩阵就能发文章。
天真,太天真了。
不经过严谨的geo芯片注释基因流程。
你那些差异表达基因,基本就是废数据。
我举个真实的例子。
去年有个学生找我救火。
他跑出来的热图,红红绿绿挺好看。
结果导师一看,直接打回。
为啥?
因为探针ID没转对。
那时候用的是旧的芯片平台。
探针直接对应基因名,中间出了偏差。
导致他最后那篇小论文,差点延毕。
这就是典型的没做对geo芯片注释基因。
大家记住,探针和基因不是简单的1对1。
很多时候,一个探针可能对应多个基因。
或者一个基因,有好几个探针在测。
你要是随便选一个,或者随便合并。
那结果偏差能大到让你怀疑人生。
我见过最惨的,是合并策略没搞对。
有人直接取平均值。
有人取最大值。
还有人取中位数。
这就得看你的芯片平台特性了。
如果是Affymetrix的芯片。
通常建议用RMA算法预处理后再注释。
如果是Illumina的。
那就要注意背景校正的问题。
这里有个坑,很多人容易踩。
就是版本问题。
现在的数据库更新太快了。
你今天用的注释文件,下个月可能就过时了。
我有个朋友,用的还是五年前的注释库。
结果发现好几个关键基因,在库里根本找不到。
后来查了资料才知道。
那些基因早就被重新分类或者合并了。
这就是不及时更新geo芯片注释基因的后果。
建议大家在R语言里,尽量用最新的BiomaRt包。
或者去NCBI官网下载最新的映射文件。
虽然麻烦点,但心里踏实。
再说个价格问题。
现在市面上有很多代做生信分析的。
报价从几百到几千不等。
你要是预算有限,自己学着做。
其实也没那么难。
网上教程一大把。
但如果你时间紧,或者数据量特别大。
找靠谱的人帮忙也是个好选择。
不过一定要问清楚。
他们用的注释库是哪个版本的。
有没有做去冗余处理。
这些细节,决定了你结果的含金量。
别光看P值小。
还得看生物学意义通不通。
我见过太多数据,统计显著。
但放到生物学背景里,完全讲不通。
这就是只注重算法,忽视注释质量。
最后再啰嗦一句。
做科研,细节决定成败。
别为了赶进度,跳过这些基础步骤。
等你文章被拒稿的时候。
再想回头改,那就晚了。
毕竟,好的数据是分析出来的。
更是注释出来的。
希望大家都能避开这些坑。
顺利毕业,顺利发文。
这行虽然卷,但只要你肯钻研。
总能找到属于自己的那篇高分文章。
加油吧,搞生物的同志们。
路还长,慢慢走,比较快。